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液相色谱仪色谱柱3大安装步骤和使用秘诀大揭密
发布时间:2013-01-04   点击次数:1096次

  液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。因此,液相色谱柱的安装和使用都有哪些应该注意和理解的呢?

色谱柱的构造分别为:柱管、压帽/卡套、筛板(滤片)、接头 
  
首先,液相色谱仪中的液相色谱柱的三大安装步骤:
液相色谱仪中的液相色谱柱安装*步
  .拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
液相色谱仪中的液相色谱柱安装第二步
  拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
液相色谱仪中的液相色谱柱安装第三步
  按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接 管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。

液相色谱柱的使用应该注意的三点:
  在色谱柱在使用前,zui好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
样品的前处理:
   zui好使用流动相溶解样品,使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质,使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
流动相流速的选择:
  因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求zui佳柱效,zui好使用zui佳 流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用zui佳流速时,分析时间可能 延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
流动相的配制:
   液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备的特点是,流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中);流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外);流动相的黏度要尽量小,以便在使用 较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度);

 
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